A decis să devină actriță în timpul tinereții, după ce a admirat actrițe în filme. Apoi a luat lecții de actorie în Lyon cu actorul și regizorul Christian Taponard. În 1989, s-a mutat la Paris pentru a studia istoria, precum și lecții de dramă în clasele libere de la Cours Florent, apoi la Conservatorul Național de Artă Dramatică timp de trei ani, avându-i ca profesori pe Jacques Lassalle și Catherine Hiegel.
La începutul anilor 1990, a obținut primele sale roluri mici în cinematografie, apoi în lungmetraje precum Povestea băiatului care voia să fie sărutat de Philippe Harel (1994), Le Plus Bel Age..., de Didier Haudepin (1995) sau chiar Iubire, etc. de Marion Vernoux (1996).
În 1997, Sylvie Testud a trăit primul său mare succes la cinema în Germania cu filmul Beyond Silence de Caroline Link, pentru care a învățat limba germană, clarinetul și limbajul semnelor. A fost recompensată ca cea mai bună actriță de către Premiul Filmului German (echivalentul César pentru cea mai bună actriță). În 1998, a jucat primul său rol major în cinematografia franceză și a avut un mare succes în Franța cu rolul lui Béa în Karnaval, primul lungmetraj al lui Thomas Vincent, pentru care a fost nominalizată la César pentru cea mai bună speranță feminină și a primit Premiul Michael Simon. Apoi a început o carieră importantă în actorie, având o preferință pentru cinematografia de autor.
În 2000, interpretarea ei în La